Категории
Сменить пароль!
Сброс пароля!
Фибробластоподобные синовиоциты при ревматоидном артрите (РА-ФПС) обладают устойчивостью к воздействию метотрексатом (MTX).
Данное исследование предполагает наличие механизма выживания, позволяющего избежать нарушений процессов клеточного биосинтеза за счет выработки веществ-ингибиторов метаболизма метотрексата (MTX), что позволяет поддерживать жизнедеятельность клеток в стрессовых метаболических условиях. Таким образом, комбинация MTX и ингибиторов аутофагии может стать эффективным методом лечения ревматоидного артрита (РА).
Фибробластоподобные синовиоциты при ревматоидном артрите (РА-ФПС) обладают устойчивостью к воздействию метотрексатом (MTX).
Для углубленного изучения механизмов развития устойчивости выделялись РА-ФПС и фибробластоподобные синовиоциты при остеоартрозе, после чего они подвергались воздействию MTX. Мы провели in vitro анализ аутофагии, индуцированной MTX, а также его связи с апоптозом.
Жизнеспособность клеток определялась с помощью анализа с 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолобромидом, а апоптоз определялся с помощью проточной цитометрии и вестерн-блоттинга. Аутофагия определялась посредством просвечивающей электронной микроскопии, а также анализа вестерн-блоттинга.
Уровни экспрессии Беклина-1, LC3, Akt, p-Akt, мишени рапамицина в клетках млекопитающих (mammalian target of rapamycin, mTOR), p-mTOR, группы хромосомных белков-1 с высокой подвижностью (high mobility group box chromosomal protein 1, HMGB1) и каспазорасщепленного фрагмента поли (АДФ-рибоза)-полимеразы с 85 кДа определялись посредством анализа данных вестерн-блоттинга.
Степень MTX-индуцированного апоптоза в ОА-ФПС была выше по сравнению с РА-ФПС. Хотя MTX вызывал реакцию аутофагии за счет активации аутолизосомалных структур в РА-ФПС, в ОА-ФПС такой реакции не наблюдалось.
В РА-ФПС трансфекция с Беклин-1-короткими интерферирующими РНК подавляла процесс аутофагии и повышала чувствительность к MTX, вызывавшему гибель клеток. MTX способствовал активации аутофагии скорее благодаря способности повышать экспрессию HMGB1 и Беклина-1, чем за счет реакций метаболизма Akt/mTOR.
Индукция аутофагии в фибробластах у пациентов с ревматоидным артритом связана с устойчивостью к метотрексату.
Arthritis Res Ther. 2015 Dec 23;17:374.
Autophagy induction contributes to the resistance to methotrexate treatment in rheumatoid arthritis fibroblast-like synovial cells through high mobility group box chromosomal protein 1.
Xu K и соавт.
Комментарии (0)